رسالة ماجستير عن " انتاج واستخلاص متعدد بيتا هيدروكسي بيوتاريت من بكتريا التربة "
نوقشت في كلية العلوم قسم علوم الحياة رسالة الماجستير للطالبة نوره عامر رسالتها الموسومة (انتاج واستخلاص متعدد بيتا هيدروكسي بيوتاريت من بكتريا التربة ). تضمنت الرسالة عزل خمسة واربعون عزله من 35 عينة من التربة في مواقع مختلف من محافظه بابل وتم فحصها لإنتاج poly-?-hydroxybutyrate عن طريق Nile blue A. فقط ثلاثة عزلة تعود إلى .Bacillus sp أظهرت نتيجة إيجابية لصبغه النيل الازرق A. وتم التاكد باستخدام صبغه اخرى Nile red اكثر تخصص لـ polyhydroxybutyrate.
بعد التشخيص الاولي , تم استخلاص البوليمر بواسطة هايبوكلورات الصوديوم والكلورفورم ,مستخلص poly-?-hydroxybutyrate المنتج قورن ما بين العزلات الثلاثة للحصول على العزلة القادرة على انتاج البوليمر بنسبه عالية. وهي عزلة من حي الجزائر في بابل . تم تشخيصها وتميزها باختبار المورفولوجية والكيميائية الحيوية والدراسة الميكروسكوبية والجزيئية باستخدام triosephosphate isomerase (tip) كبادء, بعد مقارنه تسلسل قطعه الحمض النووي إلى قاعدة البيانات NCBI ، أظهرت نتائج ان 99 ? مماثلة لسلالة Bacillus cereus M13.
اظهر التشخيص الكمي للبوليمر امتصاصيه عند nm235 باستخدام Uv-spectrophotometer. تم استخدام مطياف الأشعة تحت الحمراء (FTIR) لإظهار المجاميع الوظيفية للبوليمر، حيث تبين الذروة في 1743،71 سم -¹ الدالة على وجود مجموعة الكاربونيل (C = O)وهذا يشير الى ان البوليمر المستخلص بشكل amourphs. وتظهر النتيجة أن البوليمر المستخرج كان متعدد-?-هيدروكسي بيوتاريت. وفقا لذروته عند 2926.01 و 2854.65 سم -¹ حيث تشير إلى وجود مجموعة ألكيل-CH3 عند استخدام الجلوكوز كافضل مصدر للكاربون في تركيز 5?.
تم تنظيم الظروف والعوامل الاخرى لزياده إنتاج البكتريا للبوليمر ، اظهرت عزله Bacillus cereus strain M13 قابليه على الاستفاده من مصادر كاربونيه مختلفه تمثلت بالغلوكوز, مستخلص البطاطا, بقايا زيت زهره الشمس, نخالة القمح, نخالة الارز, دبس التمر, وبقايا القهوه , بينما اظهر الغلوكوز فرق معنوي لانتاج poly-?-hydroxybutyrate بنسبة (4.30±0.70)% من الوزن الجاف للخلايا, واظهر هذا المصدر الكاربوني فرق معنوي بتركيز 5% لانتاج البوليمر بنسبة (38±3.05)% من الوزن الجاف للخلايا. تمت دراسة تاثير مصادر نايتروجينه مختلفة, اظهرت المصادر العضويه متمثله بمستخلص الخميره والببتون فرق معنوي لانتاج البوليمر بنسبة (6.20±0.20) و (5.00±1.00)على التوالي, اكثر من المصادر اللاعضويه متمثله بكبريتات الامونيوم وكلوريد الامونيوم, اظهر مستخلص الخميره فرقا معنويا بتركيز 0.5% لانتاج البوليمر بنسبة(40.00±10.00)% من الوزن الجاف للخلايا و كذلك درجه الحراره عند 37?C اظهرت فرقا معنويا لانتاج البوليمر بنسبة (40.00±5.00)% من الوزن الجاف للخلايا.
يظهر تحليل كروماتوجرافي الغاز تشابهًا في الحزم بين البوليمر المستخلص والبولي بيتا-هيدروكسي بيوتاريت من شركة (سيغما) ، التي تؤكد على ان البوليمر المستخرج هو بولي-بيتا-هيدروكسي بيوتاريت. تمت دراسة الخصائص الاخرى للبوليمر باستخدام مسح كمية الحراره التفاضلي والثيرموغرافيمتري (DSC/TGA) وكانت درجه الذوبان ((T?للبوليمر من 142-182 درجه مئويه ، اما تحلل البوليمر كان في تفاعلين عند (210.6-447.9) درجة مئوية والفقدان بالوزن الجزيئي كان بنسبه 51% . كان الوزن الجزيئي6.4*10? دالتون، حيث يعتبر جيد ومقبول للاستخدام في التطبيقات الصناعية.
تم تصنيع الجسيمات النانوية لاوكسيد الزنك من ال Bacillus sp., وتمت دراسة هذه الجسيمات النانوية عن طريق التحليل بواسطة قياسها بجهاز الطيف الضوئي وجهاز حيود الاشعة السينية و جهاز مطياف الاشعة تحت الحمراء ، اظهرت هذه الجسيمات النانوية امتصاصيه عند 415 nm بواسطه جهازالطيف الضوئي, وكما اظهرت حزمه عند 590.24 باستخدام جهاز مطياف الاشعه تحت الحمراء,واظهرت اربعه زويا من 2? (31.331?, 34.902?, 36.594?, 47.91?) باستخدام حيود الاشعه السينية. بعد ذلك تم استخدام هذه الجسيمات النانوية لتخليق فيلم PHB-ZnO nanocomposite. تم فحص النشاط المضاد للجراثيم للفيلم ضد نوع من البكتيريا السالبه ونوع من البكتريا الموجبه لصبغه جرام ، اظهرت النتائج بأن PHB-ZnO nanocomposite يثبط بكتريا الكوليرا ( Vibrio cholera) اكثرمن المكورات العنقودية الذهبية ( Staphylococcus aureus).وكانت الرسالة تحت اشراف الدكتورة وجدان تاج الدين والتدريسية انوار كاظم ونوقشت من قبل الدكتور قاسم نجم والدكتور محمد عبد الله واستاذ مساعد فرح طارق .
اعلام الكلية / عماد الزاملي