الببتيدات

Proteins البروتينات
تع نٌٌ تسلسل الحوامض الام نٌ ةٌ ف السلسلة الببت دٌ ةٌ :
Edman Reagent باستخدام عامل ادمان N-terminal -1 تع نٌٌ الحامض الام نٌ ف النها ةٌ النتروج نٌ ةٌ
Carboxypeptidase باستخدام انز مٌات C-Terminal -2 تع نٌٌ الحامض الام نٌ ف النها ةٌ الكاربوكس لٌ ةٌ
و الذي كٌسر الحوامض الام نٌ ةٌ من الجهة الام نٌ ةٌ وتصبح حوامض Carboxypeptidase A و تقسم الى
كٌسر الحوامض الام نٌ ةٌ وتكون Carboxypeptidase B ب نٌما الانز مٌ Ala,Ile,Leu,Val ام نٌ ةٌ حرة وهم
. Arg,Lys حوامض ام نٌ ةٌ حرة و هم
-3 الحوامض الام نٌ ةٌ الت تكسر الاواصر الببت دٌ ةٌ الداخل ةٌ : وهم
من الجهة Arg,Lys كٌسر الاصرة الببت دٌ ةٌ المرتبطة بها الحوامض الام نٌ ةٌ ,Trypsin أ-انز مٌ التربس نٌ
الكاربون لٌ من الاصرة الببت دٌ ةٌ .
كٌسر الاواصر الببت دٌ ةٌ المرتبطة بها الحوامض الام نٌ ةٌ من , Chymotrypsin ب- انز مٌ ك مٌوتربس نٌ
. Trp,Tyr,Phe الطرف الاصرة الكاربون لٌ للحوامض الام نٌ ةٌ الارومات ةٌ
Ala,Gly,Ser ا ضٌا تكسر الاصرة الببت دٌ ةٌ من نها تٌها الكاربون لٌ ةٌ للحوامض الام نٌ ةٌ , Elastase -4 انز مٌ الالست زٌ
لكسر الاصرة الببت دٌ ةٌ للحامض الام نٌ م ثٌ وٌن نٌ من طرف الاصرة CNBr -5 استخدام الكاشف س اٌنوج نٌ بروما دٌ
الكاربون لٌ .
الت تربط ب نٌ –S-S- ) Cystine لاكسدة الكبر تٌ ف الس سٌت نٌ Performic acid -6 استخدام ب رٌفورم كٌ
سلسلت نٌ ببت دٌ ةٌ ( الى كسر هذه الرابطة دون تاثر الاواصر الببت دٌ ةٌ الاخرى ف كلا السلسلت نٌ , و حسب
التفاعل التال :
و ذلك باختزال الطرف الحامض الى C-terminal -7 من الممكن تع نٌٌ النها ةٌ الكاربوكس لٌ ةٌ للسلسلة الببت دٌ ةٌ
كحول ,ثم كسر الحامض الام نٌ المحتوي على الكحول بواسطة حامض اله دٌرول كٌ بترك زٌ 6 نورمال ,حسب التفاعل التال
Proteins البروتينات
الشكل التال ) ( مٌثل عمل اٌت تحد دٌ الترت بٌ الاول للحوامض الام نٌ ةٌ ف سلسلة ببت دٌ ةٌ
مثال 1
ببت دٌ تٌكون من الاحماض الام نٌ ةٌ الات ةٌ :
Asp, Ser, Leu, Phe, Tyr
, DNP-Leu عومل مع كاشف سانكر فاعطى
, Ser فانفصل عنه Carboxypeptidase و عوملت الببت دٌ مع انز مٌ
و التحلل الجزئ الحامض الجزئ للببت دٌ اعط النواتج الات ةٌ :
Asp + Tyr-Ser +Leu-Phe
ماهو تسلسل الاحماض الام نٌ ةٌ ف الببت دٌ؟
الحل:
هو الحامض الام نٌ ف الطرف النتروج نٌ و هو الناتج من اتحاده مع كاشف سانكر, Leu ال وٌس نٌ
, Carboxypeptidase هو الحامض الام نٌ ف الطرف الكاربوكس لٌ الناتج من تفاعل انز مٌ Ser س رٌ نٌ
و كذلك الس رٌٌ نٌ مرتبطا مع التا رٌوس نٌ ف Leu-Phe ف القطعة الببت دٌ ةٌ Phe مرتبط مع Leu و لما كان
كٌون ب نٌ Asp نت جٌة التحلل الجزئ للحامض , اذن كٌون حامض السبارت كٌ Tyr-ser القطعة الببت دٌ ةٌ
القطعت نٌ اي ف الترت بٌ الثالث من تسلسل الحوامض الام نٌ ةٌ ف الببت دٌ الاصل , و لذلك تكون تسلسلات
الحوامض الام نٌ ةٌ ف السلسلة الببت دٌ ةٌ الاصل ةٌ بالشكل الات :ً
Leu-Phe-Asp-Tyr-Ser