جرت في قسم علوم الحياة مناقشة طالبة الدكتوراه نور جاسم محمد جبار بإشراف الأستاذ الدكتور أزهار عمران لطيف الذهب عن رسالتها الموسومة" البكتيريا شديدة الحساسية بين التهابات الجهاز التناسلي البولي مع دراسة مناعية " . تألفت لجنة المناقشة من : أ.د. هدى هادي محمد من كلية الطب \ جامعة بابل رئيسا , أ.د. عبير ظاهر ناجي من كلية الطب \ جامعة كربلاء عضوا , أ.د. عادل عبيد حسوني من جامعة الفرات الأوسط التقنية \ المسيب عضوا , أ.م. لبنى عبد المطلب حكيم من مركز بحوث البيئة \ جامعة بابل عضوا, أ.م. سرى إحسان عبد من كلية العلوم \جامعة بابل عضوا , أ.د. أزهار عمران لطيف الذهب من كلية العلوم \ جامعة بابل مشرفا . المايكوبلازما كائنات حية بطيئة النمو تفتقر الى جدار خلوي و تعزل في الغالب من المسالك البولية التناسلية . على الرغم من ان العديد من انواع المايكوبلازما تعتبر فلورا طبيعة , الا ان بعض الانواع تسبب امراضا خطيرة في الجهاز التناسلي .
تهدف الدراسة الحالية الى تحديد العلاقة بين العدوى الميكروبية شديدة الحساسية (انواع المايكوبلازما و اليوريابلازما ) و بعض المعايير المناعية لعدوى المسالك البولية التناسلية لدى النساء المتزوجات فقط (حوامل - غير حوامل ) و لتحقيق هذا الهدف و للحصول على نتائج موثقة , تم تطبيق تقنيات هي طريقة الزرع و فحص تفاعل سلسلة البلمرة , للتحقق في مسببات الامراض الميكروبية .
شملت هذه الدراسة جمع 223 عينه (123 من النساء الحوامل و 100 من النساء غير حوامل ), ( ادرار + دم ) من مرضى المسالك البولية التناسلية ( حسب التشخيص المختبري الاولي من قبل وحده الطفيليات لجميع المرضى قيد الدراسة ) , التي وصلت الى مستشفى الولادة و الاطفال في بابل والعيادات الخاصة في محافظة بابل, خلال ستة اشهر ( من كانون الثاني الى حزيران , 2021). العينات التي جمعت من المرضى تشمل كمية من مصل الدم (للاختبارات المناعية) و كمية من الادار قسم الى انبوبين , الاول للفحص البكتيري و الانبوب الثاني للاختبارات المناعية . بالاضافة ال 20 عينة ( ادار و مصل الدم) جمعت من النساء المتزوجات السليمات كمجموعة سيطرة (10 حوامل + 10 غير حوامل) . تم توزيع عينات المرضى الى ثلاث مجموعات حسب الفئات العمرية (20-29) سنة 103 (46.19%) مريض , فقط 36 حالة موجبة للزرع المايكوبلازما ( 26حامل و 10 غير حامل), (30-39) سنة 72 (29,32%) مريض , فقط 21 حالة موجبة للزرع المايكوبلازما (12 حامل و 9 غير حامل) و (40-49) سنة 48 (52,21%) مريض , فقط 13 حالة موجبة للزرع المايكوبلازما (2 حامل و 11 غير حامل) .
تم تحديد العزلات وفقاً لأوساط زرعيه عادية للتحقق في مسببات الامراض الشائعة و اوساط زرعيه أغنائية للتحقق في مسببات الامراض بطيئة النمو وثم التأكيد بواسطة تفاعل سلسلة البلمره .
عزلت و شخصت بكتريا ( Mycoplasma genitalium , Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum ) على اوساط اغنائية انتقائية زرعية ( (MAU- mediumفضلا" عن بعض الاختبارات الكيموحيوية و تفاعل سلسلة البلمرة , ( PCR assay ) كما اختبرت الحساسية الدوائية للمضادات الحيوية تجاه تلك العينات .
أظهرت النتائج ان نسبة عزل بكتريا المايكوبلازما لـ 123 عينه من النساء الحوامل كانت 40 (5,32%) شملت M. genitalium, U. urealyticum , M. hominis , ونمو مختلط , 25(20.3%) و 2(1.6) و 9(7.3%) و 4(3.3%) , على التوالي . فيما كانت نسبة العزل لغير الحوامل 30(30%) شملت , M. hominis , M. genitalium U. urealyticum و نمو مختلط , 19(19%) , 3(3%) , 4(4%) ,4(4%) , على التوالي . كانت النسبة المئوية في الريف اعلى عن الحضر في كل من النساء الحوامل و النساء غير الحوامل حيث بلغت 28/40 (76,22%) و 16/30 (16%) , على التوالي .
كان أجمالي معدل الاصابة بالمسالك البولية التناسلية التي تسببها M. genitalium اعلى معنويا 44/70 (73,19%) , بينما معدل الاصابة بـ U. urealyticum , M. hominis و نمو مختلط و التي شكلت 13/70 (83,5%) , 5/70(24,2%) و 8/70 (59,3%) , على التوالي .
علاوة على ذلك , أشارت النتائج الى ان الاصابة بـالمايكوبلازما التناسلية كانت مرتبطة مع العمر حيث ان الفئة العمرية (20-29) نسبتها 36(14,16%) اعلى نسبة ايجابية للزرع , تلتها الفئة العمرية (30-39) نسبتها 21(42,9%) و اخيرا الفئة العمرية (40-49) نسبتها 13(83,5%) .
فيما يتعلق باستخدام اختبار PCR , أوضحت النتائج ان 37/70 (59,16%) , 20/70 (97,8%) و 13/70 (83,5%) , من العينات المختبرة كانت ايجابية لــ M. genitalium , M. hominis و U. urealyticum , على التوالي .
تم فحص النتائج الحالية لمجموعة النيوكليوتيدات و تأكيدها بأستخدام جين 16S rRNA معلومات قواعد بيانات تسلسل M.gentialium المسجلة في البنك الجيني . أظهرت النتائج ان تحديد التسلسل يتراوح من 72% الى 84% تم الحصول عليها لــ (7) عزلات من اصل (11) عزلة محاذاة مع عزلات مرجعية متقاعدة في قاعدة بيانات البنك في المركز الوطني للمعلومات التكنولوجيا الحيوية . ارتبط التسلسل المحلي لــ M.genitalium رقم 6 ارتباطا وثيقا بالتسلسل MZ379495.1لــ Mycoplasma genitalium strain MIMQ1 (العراق) وبالقرب من تسلسل MZ379496.1لــ Mycoplasma genitalium strain MIMQ2 (العراق) و تسلسل NR 026155.1لــ Mycoplasma genitalium strain G37 ATCCL43967.2 .
شجرة النشوء و التطور للتسلسل الجزئي عملت باستخدام 7 عزلات من هذه الدراسة مع تسلسلات مرجعية مماثلة في البنك الجيني للعثور على درجات تحديد الجينات و التشابه و مقارنتها بعزلاتنا .
تم استخدم اختبار الحساسة لجميع العزلات ضد 8 من المضادات الحيوية , و اظهرت النتائج في هذه الدراسة كانت عزلات M.genitalium , M.hominis و U. urealyticum حساسة تماما (100%) لمضادات Ofloxacin , Doxycycline و Clindamycin .
كما كانت جمع عزلات M. hominis و U. urealyticum حساسة تماما (100%) لـ Ciprofloxacin , لكن عزلات M. genitalium كانت حساسة بنسبة (3,77%) لـ Ciprofloxacin .
أظهرت النتائج ان 100% من عزلات الـ U. urealyticum مقاومة لـ Erythromycin . من ناحية اخرى , كانت عزلات M. hominis مقاومة تماما (100%) لـ Erythromycin and Azithromycin .
نتائج الفحص المناعي لبعض المعايير المناعية اجريت باستخدام تقنية الاليزا (ELISA) لقياس تركيز انترلوكين 18 و TLR-6 و انترفيرون بيتا جهازيا و موضعيا .
انترلوكين 18 هو سايتوكين له خصائص محفزة للالتهابات . قياس تركيز انترلوكين 18 لإدرار المرضى (39,13±3,3) اظهر وجود زيادة معنوية مقارنة بالسيطرة (63,10±1,2) , بينما قياس تركيز انترلوكين 18 في مصل المرضى (01,12±8,9) تبين عدم وجود فرق معنوي مقارنة بمجموعة السيطرة (22,9±4,2) .
من ناحية اخرى TLR-6 هو بروتين متغاير له خصائص ذاتية للالتهابات . قياس TLR-6 لإدرار المرضى (08,2±3,0) لوحظ وجود فرق معنوي مقارنة بالسيطرة (70,1±4,0), بينما قياس مستقبل شبيه بالرسم 6 في مصل المرضى (21,2±4,1) لم يظهر زيادة معنوية مقارنة مع مجموعة السيطرة (80,1±5,0) .
كذلك انترفيرون بيتا هو سايتوكين له خصائص محفزة للالتهابات و مضادة لالتهابات . قياس تركيز انترفيرون بيتا لإدرار المرضى (89,269±1,66) اظهر وجود زيادة معنوية مقارنة بالسيطرة (22,210±3,69) , و قياس تركيز انترفيرون بيتا في مصل المرضى (56,230±5,91) تبين وجود فرق معنوي مقارنة بالسيطرة (38,174±2,36) .
في ضوء النتائج التي قدمتها الدراسة نستنتج ان تقنية الـ PCR هي الطريقة الاكثر فعالية و دقة و مفيدة للكشف عن انواع المايكوبلازما و اليوريابلازما المسببة لالتهابات البولية التناسلية عند النساء المتزوجات , وايضا اثبتت تأثر الجهاز المناعي للمرضى نتيجة للإصابات البكتيرية موضعيا و جهازيا .